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二手发酵罐使用的时候怎么确定菌体生长状况?
更新时间::2020-08-01 14:29:11



二手发酵罐使用的时候怎么确定菌体生长状况,菌体生长的情况比较严重,所以今天小编就为大家整理了有关发酵罐使用的时候怎么确定菌体生长状况,接下来大家一起来看一下吧!


发酵罐使用的时候怎么确定菌体生长状况

发酵罐为研究小型发酵罐分批培养过程中大肠杆菌的菌体生长状况,本实验以分批培养法培养大肠杆菌,通过控制发酵过程的温度、溶氧、搅拌速度、空气流量、泡沫水平等参数,并每小时取样测DO值和还原糖量,制作菌体生长曲线,以此判断大肠杆菌的生长发酵状况。本实验选用生长迅速的大肠杆菌进行发酵罐的培养,同时定时地取样测定,包括对菌体进行镜检、测定不同时期发酵液的细菌浊度以及残留还原糖的变化发酵过程中,微生物的生长呈一定规律,掌握微生物生长曲线,可以防止菌种老化退化、防止有害产物积累、提高发酵的效率,对生产有指导意义。通过测定生化指标,可大体了解菌体生长曲线,并在此基础上采取适当措施促进微生物生长。生长曲线中,微生物产生代谢产物或抗生素多在对数期末期或稳定期,因此可采取方法延长次期,如通过发酵罐等方法,不断调节培养基的pH值,去除有害物质,增加适量的气体和营养物质,使微生物延迟进入或不进入退化期,从而生产出大量的有用的代谢产物。发酵罐是生化、食品、农药、化工等生产领域的常用设备,虽然发酵罐的类型很多,如自吸式、气升式等。但发酵工厂用得多的还是传统的通用发酵罐(机械搅拌发酵罐)[2]。发酵罐配备控制系统,它主要是对发酵过程中的各种参数如温度、pH、溶解氧、搅拌速度、空气流量、补料、泡沫水平等进行设定、显示、记录以及对这些参数进行反馈调节控制配制培养基 1) 配制种子固体培养基100mL,分装试管,0.1MPa灭菌20min,然后摆成斜面。 2) 配制种子培养液600mL,分装50mL于一个250mL三角瓶中(作一级种子瓶),余下550mL平均分装于三个500mL三角瓶中(作二级种子用),同上灭菌。 1.2.2接种与培养


1) 上罐前两天,从冰箱中取出菌种转接斜面,37℃培养24h。 2) 上罐前一天,由斜面菌种转接一级种子瓶, 37℃振荡培养12h,然后转接二级种子瓶, 37℃振荡培养10h。 1.3上罐前的准备及实罐灭菌 1) 洗净发酵罐及各联接胶管 2) 配制发酵培养基5.0L,置发酵罐内,加入几滴泡敌。  3) 校正pH电极和溶氧(DO)电极。  ) 把电极插口、取样管、补料口、消泡剂料瓶等固定、密封好后,开夹套出、进水阀V2、W1,发酵罐使夹套充满水,用保护罩盖住罐盖及发酵罐,用倾倒螺钉锁紧法兰,开保护罩顶部排气阀V4,启动蒸气发生器,启动搅拌马达,调转速300r/min,开启冷凝水出水阀V1,开启蒸气阀门S1,进行在位灭菌。  5) 当保护罩顶部阀门V4有蒸气排出时,2min后关闭阀门,当罐温接近灭菌温度时,微开阀V4适当排气,并调整蒸气阀S1维持罐温。保温结束后,关蒸气阀S1,全开冷凝水出水阀V1,开进水阀W3,发酵罐将温度设定在37℃,切入自动。 6) 当温度降到100℃以下,缓缓开排气阀V4,使保护罩顶压力表指示为零,移去保护罩。  7) 连接通气管路,将进气过滤器K7口与控制台左侧空气出口连通,开弹簧夹,接通空气压缩机电源,对发酵罐进行通气,调整空气流量3~5L/min。  8) 当温度达到37℃时,将预先灭菌的pH电极、DO电极(75%酒精消毒、UV消毒)接入发酵罐,连接各电极导线。

 

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